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利用重组毕赤酵母生产蛋白A的方法
- 专利权人:
- 大连理工大学
- 发明人:
- 贾凌云,郝晶,任军,徐丽
- 申请号：
- CN201310232528.7
- 公开号：
- CN103333911A
- 申请日:
- 2013.06.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 梅洪玉
- 摘要：
- 本发明涉及一种利用重组毕赤酵母生产金黄色葡萄球菌蛋白A的工艺，所述生产工艺为利用质粒pPIC9K将蛋白A抗体结合区基因整合入毕赤酵母GS115基因组中，并经筛选、表达及纯化条件优化获得有活性的外泌表达蛋白A。本发明提供了所述重组菌的制备、筛选，以及利用该菌株表达蛋白A的培养、发酵方法及其所表达的蛋白A纯化方法。该菌株首先在BMGY培养基中培养约17小时后，再在pH2.6-5.6，含0.5%-2.0%甲醇的培养基BMMY中进行表达筛选和优化。然后在发酵罐中对重组蛋白A表达进行进一步优化，最终蛋白A表达量可达每升菌液8-10g，约占外泌总蛋白的80%。并通过除盐柱过滤和离子交换层析纯化得到高纯度的蛋白A，收率近80%。此工艺为低成本大规模生产高纯度蛋白A创造了有利条件。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
