KOTIN, Robert, Michael,UCHER, Anna,MALAKIAN, Ara, Karl
申请号：
USUS2020/018332
公开号：
WO2020/168222A1
申请日:
2020.02.14
申请国别(地区):
US
年份:
2020
代理人:
摘要：
Provided herein are methods for producing DNA vectors comprising incubating a population of cells harboring the vector polynucleotide encoding a heterologous nucleic acid operatively positioned between a first and a second AAV inverted terminal repeat DNA polynucleotide sequence (ITRs), with at least one of the ITRs having nucleotide sequences corresponding to AAV wild type ITR in the presence of only a single species of Rep protein having at least DNA binding and DNA nicking functionality, under conditions effective and for a time sufficient to induce production of the DNA within the cells and harvesting and isolating the resultant DNA with the ITRs from the cells.La présente invention concerne des procédés de production de vecteurs ADN comprenant l'incubation d'une population de cellules hébergeant le polynucléotide vecteur codant pour un acide nucléique hétérologue positionné de manière fonctionnelle entre une première et une seconde séquence polynucléotidique d'ADN à répétition terminale inversée de l'AAV (ITR), au moins l'une des ITR comportant des séquences nucléotidiques correspondant à l'ITR de type sauvage de l'AAV en présence d'une seule espèce de protéine Rep comportant au moins une fonctionnalité de liaison à l'ADN et de coupure d'ADN, dans des conditions et pendant une durée suffisantes pour induire la production de l'ADN à l'intérieur des cellules, cela étant suivi de la récolte et de l'isolement de l'ADN à ITR résultant à partir des cellules.
