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TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC炎症反应模型的制备方法
- 专利权人:
- 江苏省农业科学院
- 发明人:
- 黄午阳,王兴娜,李春阳,闫征,王帆,王健
- 申请号:
- CN201310718727.9
- 公开号:
- CN104726393A
- 申请日:
- 2013.12.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及一种TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC炎症反应模型的制备方法,属于生物技术领域。内容包括:1)HUVEC细胞培养:HUVEC细胞用M199完全培养基置于37℃,5%CO2的温箱中培养。2)HUVEC样品制备:待细胞长满至80%-90%单层,用15ml的1mg/ml的I型胶原酶消化15-20min制备成细胞悬液,调整细胞浓度为1*106/ml。3)HUVEC细胞同步化:取2ml细胞悬液至6孔板进行培养,当细胞长满至90%时,换无血清的培养基进行饥饿培养24h,使所有细胞同步化。4)TNF-α诱导HUVEC细胞炎症反应:加入终浓度为10ng/ml的TNF-α,刺激HUVEC细胞6h,取细胞上清液ELISA法测定细胞炎症因子MCP-1、ICAM-1、VCAM-1,蛋白含量均升高。本发明建立起的HUVEC炎症反应细胞模型,简便易行,可用于炎症反应机理研究和抗炎药物的体外细胞实验。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/