一种大肠杆菌感受态细胞的制备及其转化方法

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专利权人:

深圳宏康生物科技有限公司

发明人:

赵大显,张小君,陈娟,程海艳

申请号：

CN201510954586.X

公开号：

CN105420157A

申请日:

2015.12.20

申请国别(地区):

中国

年份:

2016

代理人:

摘要：

本发明涉及一种大肠杆菌感受态细胞的制备及其转化方法，包括如下步骤：在SOB液体培养基中培养大肠杆菌，至OD₆₀₀为0.4~0.6时加入缓冲液I，冰浴后离心收集细胞，缓冲液II重悬细胞后，分装到预冷的无菌离心管中，得到大肠杆菌感受态细胞。转化过程中，DNA与感受态细胞混匀，热击后直接涂布于培养基上，而无需冰浴和复苏步骤。本发明采用特殊配方的缓冲液制备大肠杆菌感受态细胞，其转化效率可达1.23×10⁹ cfu/µg pUC19 DNA。该方法操作简单、转化效率高，重复性好，简化了大肠杆菌感受态细胞的制备和DNA转化操作，为DNA的高效快速转化提供了技术基础。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/