The present invention relates to antisense oligonucleotides comprising at least one N3 '→ P5' phosphorodiamidate linkage (NPN) in the backbone, as well as methods of using the same. This antisense oligonucleotide can effectively prevent or reduce protein expression. According to the present invention, the nucleoside subunits of the oligonucleotide are oligonucleotides joined by intersubunit linkage, and at least one of the intersubunit linkages is a phosphorothioate or phosphate linkage.本発明は、骨格に少なくとも1つのN3’→P5’ホスホロジアミデート結合(NPN)を含むアンチセンスオリゴヌクレオチド、ならびにそれを使用する方法に関する。このアンチセンスオリゴヌクレオチドは、タンパク質の発現を有効に防止または低減することができる。本発明によれば、オリゴヌクレオチドのヌクレオシドサブユニットが、サブユニット間結合によってつながっているオリゴヌクレオチドであって、サブユニット間結合の少なくとも1つが、ホスホロチオエートまたはホスフェート結合である。