本发明公开了一种人表皮松解性掌跖角化症小鼠模型的构建方法,将小鼠Krt9基因第434位核苷酸的A突变为GGCT,构建SEQ ID NO:1所示含有重组Krt9基因的打靶质粒载体,筛选携带有重组Krt9基因的小鼠,即为所述人表皮松解性掌跖角化症小鼠模型;本发明利用基因打靶技术产生,筛选到了国际上首个Krt9基因敲入突变的小鼠品系,即Krt9-indel小鼠,发现模型小鼠的表型与人EPPK完全一致,从而得到一个从基因到表型完全模仿人EPPK的特异动物模型,可进一步广泛用于人EPPK的致病病因、病理机制等研究,以及对EPPK治疗药物的筛选和基因治疗试验等。