Federalnoe gosudarstvennoe uchrezhdenie "Federalnyj issledovatelskij tsentr "Fundamentalnye osnovy biotekhnologii" Rossijskoj akademii nauk (FITS Biotekhnologii RAN)
发明人:
Shibaeva Anna Valerevna,Шибаева Анна Валерьевна,Letarov Andrej Viktorovich,Летаров Андрей Викторович,Kulikov Evgenij Evgenevich,Куликов Евгений Евгеньевич,Golomidova Alla Konstantinovna,Голомидова Алл
申请号：
RU2016151605
公开号：
RU0002633508C1
申请日:
2016.12.27
申请国别(地区):
RU
年份:
2017
代理人:
摘要：
FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: strain is derived from the protective Bacillus anthracis antigen by inserting the pTrPPA plasmids into the E. coli strain BL21 (DE3). The plasmid pTrPPA contains a T7 phage promoter that controls the expression of a fusion gene that is a product of the 142 T5-like phage DT57C gene, known as the tail-terminating protein (TrP) fused at the 3-end with domain 1 of the protective B. anthracis antigen, which allows the proteolytic cleavage during transport of a toxin into the cytoplasm of the target cell to preserve the structural stability of the antigen, and is expressed in the form of virus-like particles.EFFECT: increasing the yield of the target product under optimal cultivation conditions, obtaining of the isolated domain 1 of the main protective antigen of anthrax in the form of virus-like particles, which facilitates its purification and potentially increases immunogenicity.6 dwgИзобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантного штамма E. coli, являющегося продуцентом антигена возбудителя сибирской язвы Bacillus anthracis. Представленный штамм получен на основе протективного антигена Bacillus anthracis путем введения в штамм E. coli BL21 (DE3) плазмиды pTrPPA. Плазмида pTrPPA содержит в своем составе промотор фага Т7, который контролирует экспрессию слитого гена, представляющего собой продукт гена 142 Т5-подобного фага DT57C, известного как белок, терминирующий хвост (TrP), слитый через 3’-конец с доменом 1 протективного антигена B. anthracis, что позволяет при протеолитическом отщеплении в процессе транспорта токсина в цитоплазму клетки-мишени сохранять структурную стабильность антигена, и экспрессирующегося в форме вирусоподобных частиц. Изобретение обеспечивает выход целевого продукта не ниже 1 г/л культуры в оптимальных условиях культивирования, а также позволяет получать изолированный домен 1 основного защитного антигена возбудителя сибирской язвы B. anthracis в форме вирусоподобных частиц, что облегчает е
