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一种荧光标记根瘤菌的构建方法
- 专利权人:
- 甘肃农业大学
- 发明人:
- 师尚礼,陈力玉,李剑峰,张淑卿,曹文侠,霍平慧,苗阳阳
- 申请号：
- CN201310368545.3
- 公开号：
- CN103409406A
- 申请日:
- 2013.08.22
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 张秋云
- 摘要：
- 本发明公开了一种以灭菌紫花苜蓿叶片替代无菌滤膜作为三亲本杂交载体，以提高根瘤菌荧光标记菌株荧光质粒转移接合转移效率的方法，可用于高效构建根瘤菌CFP青色荧光蛋白基因标记菌株，该方法具体为：取紫花苜蓿的幼嫩叶片，用蒸馏水清洗后将叶片单层均匀地摆放于培养皿中，灭菌；用无菌镊子将叶片取出，贴于TY培养基表面，盖上培养皿。在三亲本杂交的过程中代替微孔滤膜，进行供体菌、辅助菌和受体菌的混合生长培养。与微孔滤膜作杂交载体相比，以苜蓿叶片为杂交载体可使荧光质粒接合转移率提高8.4-11倍，差异达显著水平；由于所使用的原料为可再生而易获得的紫花苜蓿植株叶片，原料廉价易得，操作简便，适用于根瘤菌荧光标记菌株的构建。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
