The present invention relates to methods of developing engineered T-cells for immunotherapy and, more specifically, to at least two selected from immune checkpoint genes, preferably other pathways, to increase T-cell immune activity Lt； / RTI >； cells, thereby inactivating T-cells. This method is used to precisely target the selection of key genes in T-cells, available from cultures of specific rare-cutting endogenous nucleases, particularly primary cells, or from donors. , Polynucleotides encoding such polypeptides, and TALE-nuclease (TAL effector endonuclease). The present invention opens the way to highly efficient adoption immunotherapy strategies for treating cancer and viral infections.본 발명은 면역요법을 위한 조작된 T-세포들의 개발 방법들, 그리고 더욱 특이적으로 T-세포 면역 활성을 증가시키기 위하여 면역 체크포인트 유전자들, 바람직하게는 다른 경로들로부터 선택되는 적어도 두 개를 불활성화시킴으로써, T-세포들을 변형하기 위한 방법들에 대한 것이다. 이 방법은 특이적 희귀 절단 엔도뉴클레아제들, 특히 일차(primary) 세포들의 배양으로부터 또는 도너들(donors)로부터 이용가능한, T-세포들에서 주요(key) 유전자들의 선택을 정확하게 타겟으로 하기 위하여, 이러한 폴리펩타이드들를 코드하는 폴리뉴클레오타이드들 및 TALE-뉴클레아제들 (TAL 이펙터(effector) 엔도뉴클레아제)의 사용을 포함한다. 본 발명은 암 및 바이러스 감염들을 치료하기 위한 매우 효율적인 입양 면역요법(immunotherapy) 전략으로의 길을 연다.
