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一种适用于干细胞的线粒体分离方法
专利权人:
浙江大学
发明人:
王琳琳,张晓明,王超,陈莹莹,沈岳良
申请号:
CN201610549535.3
公开号:
CN106148277B
申请日:
2016.13.07
申请国别(地区):
CN
年份:
2020
代理人:
摘要:
本发明提供一种用于高效分离干细胞活性线粒体的方法,包括如下步骤:1)将间充质干细胞检测表面标记鉴定,向骨、软骨和脂肪分化能力鉴定;2)胰酶消化,离心收集细胞;重悬清洗离心;3)配制线粒体提取液:A液是裂解液,C是终止反应液。4)A液重悬清洗过后的细胞沉淀进行涡旋、静置,重复数次;加入C液中止裂解,离心得白色沉淀留待第5步操作;上清液再离心得白色沉淀;5)第4步中首次离心的沉淀,重复第4步的操作;6)将第4步和第5步的白色沉淀放在一起,离心得白色沉淀,立即使用或者‑80度保存。本发明方法分离获得的线粒体活性好、纯度高,适用于间充质干细胞分离获得线粒体,且操作简便、不需要研磨。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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