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一种适用于干细胞的线粒体分离方法
- 专利权人:
- 浙江大学
- 发明人:
- 王琳琳,张晓明,王超,陈莹莹,沈岳良
- 申请号:
- CN201610549535.3
- 公开号:
- CN106148277B
- 申请日:
- 2016.13.07
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明提供一种用于高效分离干细胞活性线粒体的方法,包括如下步骤:1)将间充质干细胞检测表面标记鉴定,向骨、软骨和脂肪分化能力鉴定;2)胰酶消化,离心收集细胞;重悬清洗离心;3)配制线粒体提取液:A液是裂解液,C是终止反应液。4)A液重悬清洗过后的细胞沉淀进行涡旋、静置,重复数次;加入C液中止裂解,离心得白色沉淀留待第5步操作;上清液再离心得白色沉淀;5)第4步中首次离心的沉淀,重复第4步的操作;6)将第4步和第5步的白色沉淀放在一起,离心得白色沉淀,立即使用或者‑80度保存。本发明方法分离获得的线粒体活性好、纯度高,适用于间充质干细胞分离获得线粒体,且操作简便、不需要研磨。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/