本发明提供基于免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA)的小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒,包括:含细胞内阳性抗原与阴性抗原的96孔细胞培养板;阳性对照血清;阴性对照血清;样品稀释液;盐水洗涤液;HRP标记鼠抗羊McAb;二组分AEC显色液;终止液;血清稀释板和使用说明书。其中,细胞内阳性抗原为小反刍兽疫病毒rPPRV/GFP感染的BHK‑gSLAM细胞;细胞内阴性抗原为未感染小反刍兽疫病毒的BHK‑gSLAM细胞;阳性对照血清为小反刍兽疫病毒疫苗株PPRV N 75/1免疫山羊后采血,分离获得的免疫阳性血清,中和效价在1∶160以上;阴性对照血清为小反刍兽疫阴性山羊未经免疫直接采血,分离获得的阴性血清。