本发明提供了一种检测小反刍兽疫病毒(PPRV)的纳米金标记探针及检测试剂盒。针对PPRV N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针,一条探针5′端修饰生物素,另一条探针3′端修饰巯基,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.2,SEQ ID NO.3所示。本发明还提供了利用纳米金标记寡核苷酸探针检测PPRV核酸的方法,巯基化的探针通过Au-S键连接到纳米金颗粒上,靶核酸两端分别与两条探针结合,形成杂交复合物,通过与固相载体结合、银染放大信号,定量检测靶核酸。本发明的检测方法核酸最低浓度达10fmol/L,该方法灵敏度高,特异性强,为临床检测PPRV提供新的方法。