Provided are a method of producing a modified T cell comprising introducing into a precursor T cell a first nucleic acid encoding a Nef protein, wherein the Nef protein upon expression results in down-modulation of the endogenous T cell receptor (TCR) in the modified T cell, wherein the modified T cell furthermore expresses a functional exogenous receptor, such as an engineered TCR (e.g., chimeric TCR), T cell antigen coupler (TAC), TAC-like chimeric receptor, or a chimeric antigen receptor (CAR), the modified T cell obtained by the method and the pharmaceutical composition comprising the modified T cell.Also provided is a non-naturally occurring Nef protein comprising one or more mutations.L'invention concerne une méthode de production d'un lymphocyte T modifié comprenant l'introduction dans un lymphocyte T précurseur d'un premier acide nucléique codant pour une protéine Nef, la protéine Nef lors de l'expression conduisant à une modulation négative du récepteur de lymphocyte T endogène (TCR) dans le lymphocyte T modifié, le lymphocyte T modifié exprimant en outre un récepteur exogène fonctionnel, tel qu'un TCR modifié (par exemple, un TCR chimérique), un coupleur antigénique de lymphocyte T (TAC), un récepteur chimérique de type TAC, ou un récepteur d'antigène chimérique (CAR), le lymphocyte T modifié obtenu par la méthode et la composition pharmaceutique comprenant le lymphocyte T modifié. L'invention concerne également une protéine Nef d'origine non naturelle comprenant une ou plusieurs mutations.
