REGENTS OF THE UNIVERSITY OF COLORADO A BODY CORPORATE;NATIONAL JEWISH HEALTH;ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ コロラド,ア ボディー コーポレイト;ナショナル ジューイッシュ ヘルス
发明人:
CAMBIER JOHN,カムビアー,ジョン,REFAELI YOSEF,リファエリ,ヨセフ,JOHNSON SARA,ジョンソン,サラ,TURNER BRIAN CURTIS,ターナー,ブライアン カーティス,カムビアー,ジョン,リファエリ,ヨセフ,ジョンソン,サラ,ターナー,ブライアン カーティス
申请号:
JP2016027812
公开号:
JP2016129515A
申请日:
2016.02.17
申请国别(地区):
JP
年份:
2016
代理人:
摘要:
PROBLEM TO BE SOLVED: To provide methods to generate, maintain and manipulate stable cell lines that can give rise to all cell lineages that would normally arise from such cells when placed under the appropriate conditions.SOLUTION: One embodiment of the invention relates to a method for preparing conditionally immortalized adult stem cells. The method comprises the steps of: (a) obtaining an expanded population of adult stem cells; (b) transfecting the stem cells with a first nucleic acid molecule comprising a protooncogene or biologically active fragment or homolog thereof that promotes cell survival and proliferation where the protooncogene is inducible; (c) transfecting the stem cells with a second nucleic acid molecule encoding a protein that inhibits apoptosis of the cell; and (d) expanding the transfected cell in the presence of a combination of stem cell growth factors and under the conditions whereby the protooncogene is active, for preparing conditionally immortalized adult stem cells.SELECTED DRAWING: None【課題】適切な条件下におくと、通常生じる全ての細胞系統を生み出せる、安定した細胞株を作製し、維持し、操作することを可能にする方法を提供する。【解決手段】本発明の一実施形態は、条件的に不死化された成人幹細胞を作製する方法に関する。方法には、(a)増殖させた成人幹細胞集団を得るステップと、(b)細胞生存および増殖を促進するプロトオンコジーンまたはその生物学的に活性の断片またはホモログを含む核酸分子により、幹細胞をトランスフェクションするステップであり、プロトオンコジーンが誘導可能であるステップと、(c)細胞のアポトーシスを阻害するタンパク質をコードする核酸分子により、幹細胞をトランスフェクションするステップと、(d)条件的に不死化された成人幹細胞を作製するために、幹細胞成長因子の組み合わせの存在下で、プロトオンコジーンが活性である条件下でトランスフェクション細胞を増殖させるステップが含まれる。【選択図】なし