REGENTS OF THE UNIVERSITY OF COLORADO A BODY CORPORATE;NATIONAL JEWISH HEALTH;ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ コロラド,ア ボディー コーポレイト;ナショナル ジューイッシュ ヘルス
发明人:
CAMBIER JOHN,カムビアー,ジョン,REFAELI YOSEF,リファエリ,ヨセフ,JOHNSON SARA,ジョンソン,サラ,TURNER BRIAN CURTIS,ターナー,ブライアン カーティス,カムビアー,ジョン,リファエリ,ヨセフ,ジョンソン,サラ,ターナー,ブライアン カーティス
申请号:
JP2014108137
公开号:
JP2014158503A
申请日:
2014.05.26
申请国别(地区):
JP
年份:
2014
代理人:
摘要:
PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for generating, maintaining and manipulating stable cell lines that can give rise to all cell lineages that would normally arise when placed under the appropriate conditions.SOLUTION: One embodiment of the present invention relates to a method to produce conditionally immortalized adult stem cells. The method includes the steps of: (a) obtaining a proliferated population of adult stem cells; (b) transfecting the stem cells with a nucleic acid molecule comprising a protooncogene or biologically active fragment or homologue thereof that promotes cell survival and proliferation, wherein the protooncogene is inducible; (c) transfecting the stem cells with a nucleic acid molecule encoding a protein that inhibits apoptosis of the cell; and (d) proliferating the transfected cells in the presence of a combination of stem cell growth factors under the condition that the protooncogene is active, to produce conditionally immortalized adult stem cells.【課題】適切な条件下におくと、通常生じる全ての細胞系統を生み出せる、安定した細胞株を作製し、維持し、操作することを可能にする方法を提供する。【解決手段】本発明の一実施形態は、条件的に不死化された成人幹細胞を作製する方法に関する。方法には、(a)増殖させた成人幹細胞集団を得るステップと、(b)細胞生存および増殖を促進するプロトオンコジーンまたはその生物学的に活性の断片またはホモログを含む核酸分子により、幹細胞をトランスフェクションするステップであり、プロトオンコジーンが誘導可能であるステップと、(c)細胞のアポトーシスを阻害するタンパク質をコードする核酸分子により、幹細胞をトランスフェクションするステップと、(d)条件的に不死化された成人幹細胞を作製するために、幹細胞成長因子の組み合わせの存在下で、プロトオンコジーンが活性である条件下でトランスフェクション細胞を増殖させるステップが含まれる。【選択図】なし