In the present invention, the inventors have generated a Tet-On all-in-one construct that tightly regulate transgene expression in human stem cells using the original TetR repressor. By using appropriate promoter combinations and shielding the integrative construct with the Is2 insulator, they have constructed the Lent-On-Plus Tet-On system that achieves efficient transgene regulation in human multipotent and pluripotent stem cells. The generation of inducible stem cell lines with the Lent-ON-Plus system did not require selection or cloning, and transgene regulation is maintained after long-term cultured and upon differentiation toward different lineages. The present invention thus offers a solution to the need to improve transgene expression systems in stem cells.Dans la présente invention, les inventeurs ont généré une construction Tet-On tout-en-un qui régule étroitement l'expression transgénique dans des cellules souches humaines à l'aide du répresseur TetR d'origine. Par l'utilisation de combinaisons de promoteur appropriées et la protection de la construction intégrative par l'isolant Is2, ils ont construit le système Lent-On-Plus Tet-On qui atteint une régulation transgénique efficace dans des cellules souches multipotentes et pluripotentes humaines. La génération de lignées de cellules souches inductibles avec le système Lent-On-Plus ne nécessitait pas de sélection ni de clonage et la régulation transgénique est maintenue après culture à long terme et lors de la différenciation en différentes lignées. La présente invention offre ainsi une solution au besoin d'amélioration des systèmes d'expression transgénique dans des cellules souches.
