The present invention provides methods of using sequence-based assays and rational strategies to modify and improve the structural and biophysical properties of single chain antibodies (scFv), including stability, solubility, and antigen binding affinity. These methods and strategies may be used individually or in combination. The methods of the invention also include the use of a database comprising scFv sequences from a screened antibody scFv library selected as having excellent solubility and stability through experimentation. The present invention also provides methods of using the properties found for these selected antibodies in a common approach to reshaping scFv antibodies to improve the stability and solubility characteristics of single chain antibody fragments.Immunoconjugates, single chain antibodies, engineering treatments, stability, solubility, mutagenesis본 발명은 안정성, 가용성, 및 항원 결합 친화성을 비롯한, 단일 쇄 항체(scFv)의 구조적 특성 및 생체물리학적 특성을 변형시키고 개선시키기 위한, 서열에 기초한 분석 및 합리적 전략법의 사용 방법을 제공한다. 이러한 방법 및 전략법은 개별적으로 또는 조합하여 사용될 수 있다. 본 발명의 방법은 또한 실험을 통해 우수한 가용성 및 안정성을 갖는 것으로서 선택되어진 스크리닝된 항체 scFv 라이브러리로부터의 scFv 서열을 포함하는 데이타베이스의 용도를 포함한다. 본 발명은 또한 단일 쇄 항체 단편의 안정성 및 가용성 특성을 개선시키기 위해서 scFv 항체를 재형상화하는 일반 접근법에서 이들 선택된 항체에 대해 발견된 특성을 사용하는 방법을 제공한다.
