Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) (RU)
发明人:
Гордиенко Любовь Николаевна (RU),Куликова Елена Владимировна (RU),Попова Тамара Гавриловна (RU),Гайдуцкая Галина Михайловна (RU),Еланцева Наталья Борисовна (RU),Гуськова Татьяна Витальевна (RU)
申请号：
RU2013120825/10
公开号：
RU2013120825A
申请日:
2013.05.06
申请国别(地区):
RU
年份:
2014
代理人:
摘要：
A method for producing L-Brucella antigen comprising culturing Brucella abortus strain 19 in L-shape on a dense nutrient medium prepared based on meat-peptone-glycerol hepatic glucose agar (1.3-1.5% agar) supplemented with 10-15% normal horse serum and streptomycin at a dose of 25-50 IU / ml at 37-38 ° C for 4-5 days, resulting in the L- form of the culture is rinsed with saline inactivated at 85-90 ° C for 60 min, wherein the slurry is centrifuged at 3000-5000 rev / min for 15-20 min, the supernatant tidy t, and the precipitate was twice washed with saline, centrifuged at 3000-5000 rev / min for 15-20 min, added to the bacterial mass of molten phenol in a ratio of 1: 1 and pestle and triturated in a water bath for 20-30 min at 55 -60 ° C, phenol saline solution was adjusted to 5% phenol suspension is centrifuged at 5000-10000 rev / min 30-40 min, settled and the supernatant was used as an antigen, the resulting antigen is titrated, and standardized for activity and specificity are used to The binding reaction complement in the serological diagnosis of brucellosis.Способ получения бруцеллезного L-антигена, включающий культивирование штамма Brucella abortus 19 в L-форме на плотной питательной среде, приготовленной на основе мясо-пептонного печеночного глюкозо-глицеринового агара (1,3-1,5% агара) с добавлением 10-15% нормальной лошадиной сыворотки и стрептомицина в дозе 2,5-5,0 ЕД/мл при 37-38°C в течение 4-5 суток, полученную в L- форме культуру смывают физиологическим раствором, инактивируют при 85-90°C в течение 60 мин, отличающийся тем, что взвесь центрифугируют при 3000-5000 об/мин в течение 15-20 мин, надосадочную жидкость убирают, а осадок дважды промывают физиологическим раствором, центрифугируют при 3000-5000 об/мин в течение 15-20 мин, к бактериальной массе добавляют расплавленный фенол в соотношении 1:1 и растирают пестиком на водяной бане в течение 20-30 мин при температуре 55-60°C, физиологическим раствором доводят раствор фенола до 5%, фенольную суспензи
