Disclosed are a plasmid comprising a targeted anti-cancer gene and a construction method and application thereof. The method comprises the following main steps: connecting a transcription promoter with a tumor-targeting property to a therapeutic gene, inserting the connected sequence into a eukaryotic-expression plasmid, and obtaining a recombinant expression plasmid carrying the therapeutic gene. The plasmid can be used in a PEI-mediated nebulization method, and is able to treat a lung tumor.La présente invention concerne un plasmide comprenant un gène anticancer ciblé et son procédé de fabrication et son application. Le procédé comprend les étapes principales suivantes : liaison d'un promoteur de transcription ayant une propriété de ciblage de tumeur à un gène thérapeutique, insertion de la séquence connectée dans un plasmide d'expression eucaryote, et obtention d'un plasmide d'expression recombinant portant le gène thérapeutique. Le plasmide peut être utilisé dans un procédé de nébulisation à médiation par PEI, et est capable de traiter une tumeur du poumon.