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METHODS FOR ISOLATING SOLUBLE POLYPEPTIDES
专利权人:
ナショナル リサーチ カウンシル オブ カナダ;NATIONAL RESEARCH COUNCIL OF CANADA
发明人:
TANHA JAMSHID,タンハ ジャムシド
申请号:
JP2019124468
公开号:
JP2019187439A
申请日:
2019.07.03
申请国别(地区):
JP
年份:
2019
代理人:
摘要:
To provide high-throughput methods for screening polypeptides.SOLUTION: Disclosed herein is a method for identifying a polypeptide (including monomeric human Vs and Vs) having desirable biophysical properties such as solubility, stability, high expression, monomericity, binding specificity or non-aggregation, the method comprising the steps of: obtaining a phage display library; infecting a bacterial lawn with library phages; and identifying a phage forming a plaque larger than the average on the bacterial lawn. Sequences of monomeric human Vs and Vs are identified, which may be useful for immunotherapy or as diagnostic agents. Multimer complexes of human Vs and Vs are also identified. The Vs and Vs may be used to create further libraries for identifying additional polypeptides. Further, the Vs and Vs may be subjected to DNA shuffling to select improved biophysical properties.SELECTED DRAWING: Figure 1【課題】ポリペプチドをスクリーニングするためのハイスループット法の提供。【解決手段】可溶性、安定性、高発現性、単量体性、結合特異性又は非凝集性等の望ましい生物物理学的特性を有するポリペプチド(単量体のヒトVH及びヒトVLを含む)を同定し、この方法は、ファージディスプレイライブラリを得る工程と、ライブラリファージによって細菌層の感染を可能にする工程と、細胞の層上の平均よりも大きいプラークを形成するファージを同定する工程とを含む。単量体のヒトVH及びヒトVLの配列を同定し、これは免疫治療に又は診断用薬剤として有用であり得る。ヒトVH及びヒトVLの多量体の複合体も同定する。同定されたVH及びVLを使用して、さらなるポリペプチドを同定するさらなるライブラリを作ることができる。さらに、VH及びVLをDNAシャッフリングにかけて、生物物理学的特性を改良するために選別することができる。【選択図】図1
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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