Methods and compositions involving enzyme-activatable fluorophore polymer imaging agents for photodetection of specific tissues and/or human diseases and disorders are provided. In certain embodiments, the imaging agent comprises a hydrophilic polymer backbone (e.g., poly(L)lysine), a hydrophobic fluorophore, and a hydrophilic solubilizing agent. The solubilizing agent may comprise a quarternary ammonium group (e.g., a 1- methylnicotinic group) to enhance self-quenching of the fluorophore. Various methods for the generation and purification of imaging agents are also provided, including methods involving solid phase probe extraction or ion exchange purification.Linvention concerne des procédés et des compositions dans lesquels sont utilisés des agents dimagerie à base de polymères et de fluorophores activables par des enzymes, destinés à la photodétection de tissus et/ou de maladie et de troubles humains spécifiques. Dans certains modes de réalisation, lagent dimagerie comprend un squelette de polymère hydrophile (de la poly-L-lysine, par exemple), un fluorophore hydrophobe et un agent de solubilisation hydrophile. Lagent de solubilisation peut comprendre un groupe ammonium quaternaire (tel quun groupe 1-méthylnicotinique, par exemple) pour augmenter lauto-désactivation du fluorophore. Linvention concerne également diverse procédés de production et de purification dagents dimagerie, y compris des procédés comprenant une extraction de sonde en phase solide ou une purification par échange dions.