一种用于同时检测绵羊和山羊携带的六种病毒的多重PCR试剂盒,包括六对特异性引物,其中,用于蓝舌病病毒检测的引物分别为BTV-F和BTV-R;用于口蹄疫病毒检测的引物分别为FMDV-F和FMDV-R;用于小反刍兽疫病毒检测的引物分别为PPRV-F和PPRV-R;用于绵羊痘病毒检测的引物分别为SPPV-F和SPPV-R;用于山羊痘病毒检测的引物分别为GTPV-F和GTPV-R;用于羊口疮病毒检测的引物分别为ORFV-F和ORFV-R;引物序列分别为SEQ ID NO:1~12的核苷酸序列。本发明能同时检测绵羊和山羊临床样品中蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、绵羊痘病毒、山羊痘病毒和羊口疮病毒六种病毒核酸,且具有敏感性强、特异性高、操作简单、节约检测时间的特点。