Methods of generating thrombin and methods of applying a clotting tissue sealant to a site on a subject are provided. A blood component comprising platelets can be obtained from the subject. A hypotonic composition is contacted with a solid matrix to form a thrombin-containing liquid, where the hypotonic composition includes water, calcium, a blood component comprising platelets, and optionally a chelator. Calcium is present in the hypotonic composition in an amount greater than the amount of calcium that can be complexed by the chelator. Thrombin-containing liquid is then separated from the hypotonic composition and can be applied to the site on the subject to form a clot, for example, by combination with fibrinogen.Linvention concerne des procédés de génération de thrombine et des procédés dapplication dun colmatant tissulaire de coagulation sur un site dun sujet. Un composant sanguin comprenant des plaquettes peut être obtenu à partir du sujet. Une composition hypotonique est mise en contact avec une matrice solide pour former un liquide contenant de la thrombine, la composition hypotonique comprenant de leau, du calcium, un composant sanguin comprenant des plaquettes et éventuellement un chélateur. Le calcium est présent dans la composition hypotonique en une quantité supérieure à la quantité de calcium qui peut être complexée par le chélateur. Le liquide contenant de la thrombine est ensuite séparé de la composition hypotonique et peut être appliqué sur le site du sujet pour former un caillot, par exemple par combinaison avec un fibrinogène.
