一种克拉维酸高产菌株的高通量可视化筛选方法
- 专利权人:
- 山东省医药生物技术研究中心;山东建筑大学
- 发明人:
- 曹广祥,钟传青
- 申请号：
- CN201510782635.6
- 公开号：
- CN105219760B
- 申请日:
- 2015.11.12
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 张勇
- 摘要：
- 本发明公开了一种克拉维酸高产菌株的高通量可视化筛选方法。首先将两种不同荧光蛋白分别与克拉维酸合成基因簇的早期基因和晚期基因融合，获得出发重组菌株；然后诱变该重组菌株，利用突变菌产生荧光强度的变化来判断克拉维酸合成基因簇是否发生突变。初筛采用肉眼观察菌落荧光强度，选择荧光强度较大的菌落；复筛选取初筛获得的菌落，经培养后提取全细胞蛋白，用酶标仪测定荧光强度，获得克拉维酸合成基因簇高水平表达的突变菌株，最后通过发酵验证突变株的克拉维酸发酵水平。本发明的筛选方法降低了筛选的随机性和盲目性，大幅度降低劳动量，提高了筛选通量和有效性。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
