The present invention relates to a method for proteolytically processing a single-chain clostridial neurotoxin into a corresponding di-chain clostridial neurotoxin, the method comprising: providing a single-chain clostridial neurotoxin； and contacting the single-chain clostridial neurotoxin with enterokinase or factor Xa； wherein the single-chain clostridial neurotoxin has an activation loop comprising the polypeptide sequence Cys-(Xaa)a -Ile- Asp/Glu-Gly-Arg-(Yaa)b -Cys (SEQ ID NO: 1), wherein a = 1-10 and b = 4-15； and wherein enterokinase or factor Xa hydrolyses a peptide bond of the activation loop thereby producing a di-chain clostridial neurotoxin. The invention also relates to engineered clostridial neurotoxins and methods for manufacturing the same, as well as related pharmaceutical compositions, nucleotide sequences, and therapeutic uses.La présente invention concerne un procédé de traitement protéolytique d'une neurotoxine clostridiale à chaîne unique en une neurotoxine clostridiale à double chaîne correspondante, le procédé comprenant les étapes consistant à : fournir une neurotoxine clostridiale à chaîne unique； et mettre en contact la neurotoxine clostridiale à chaîne unique avec une entérokinase ou un facteur Xa； la neurotoxine clostridiale à chaîne unique ayant une boucle d'activation comprenant la séquence polypeptidique Cys-(Xaa)a -Ile- Asp/Glu-Gly-Arg-(Yaa)b -Cys (SEQ ID NO: 1), où a = 1-10 et b = 4-15； et l'entérokinase ou le facteur Xa hydrolysant une liaison peptidique de la boucle d'activation, produisant ainsi une neurotoxine clostridiale à deux chaînes. L'invention concerne également des neurotoxines clostridiales modifiées et leurs procédés de fabrication, ainsi que des compositions pharmaceutiques, des séquences nucléotidiques et des utilisations thérapeutiques associées.
