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用于四种细菌PCR检测的多重扩增内标的制备方法
- 专利权人:
- 上海交通大学
- 发明人:
- 史贤明,龙飞,施春雷,马瑜丹,张忠明
- 申请号:
- CN200810032998.8
- 公开号:
- CN101220393A
- 申请日:
- 2008.01.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2008
- 代理人:
- 王锡麟`王桂忠
- 摘要:
- 本发明涉及一种食品安全技术领域的用于四种细菌PCR检测的多重扩增内标的制备方法,步骤为:根据金黄色葡萄球菌vicK基因、沙门氏菌invA基因、单核细胞增生李斯特菌hlyA基因和副溶血弧菌toxR基因设计特异性检测引物;采用重叠PCR技术将金黄色葡萄球菌vicK基因、沙门氏菌invA基因、单核细胞增生李斯特菌hlyA基因和副溶血弧菌toxR基因的特异性检测引物序列拼接成一条核苷酸片段,构建多重扩增内标;将该人工序列克隆到质粒载体pMD-18T,构建含多重扩增内标序列的质粒pMD-mIAC;多重扩增内标分别在金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌和副溶血弧菌检测中的验证。本发明在确保检测准确性与高效性的同时大大降低检测成本。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/