The present invention is a polypeptide library for identifying a polypeptide having a high affinity for a desired target, has a scaffold with a relatively small molecule and a small number of cysteine residues, and targets a membrane protein As a polypeptide library applicable to a high-throughput screening system, it is a polypeptide library composed of a group of a plurality of polypeptides having an ICK scaffold, and the amino acid sequence of each polypeptide is the following (i) to A polypeptide library characterized by having an amino acid sequence randomized simultaneously in the region (iv) is provided. (I) the amino acid sequence from the fourth C-terminal side of Cys-1 to the first N-terminal side of Cys-2 in the loop I region between Cys-1 and Cys-2； (ii) Cys-2 and Cys Amino acid sequence from the third C-terminal side of Cys-2 to the first N-terminal side of Cys-3 in the loop II region between -3； (iii) the loop III region between Cys-5 and Cys-6 The amino acid sequence from the second C-terminal side of Cys-5 to the third N-terminal side of Cys-6； and (iv) the C-terminal 3 of Cys-6 in the tail region from Cys-6 to the C-terminal side. Amino acid sequence from the second to the C-terminal.本発明は、所望の標的に親和性の高いポリペプチドを同定するためのポリペプチドライブラリーであって、比較的低分子でシステイン残基の数も少ないスキャフォールドを有し、膜タンパク質を標的としたハイスループットスクリーニング系にも適用可能なポリペプチドライブラリーとして、ＩＣＫスキャフォールドを有する複数のポリペプチドの群で構成されるポリペプチドライブラリーであり、かつ当該各ポリペプチドのアミノ酸配列が、下記（ｉ）～（ｉｖ）の領域において同時にランダム化されたアミノ酸配列を有していることを特徴とするポリペプチドライブラリーを提供した。（ｉ）Cys-1とCys-2の間のループI領域中のCys-1のＣ末側４番目からCys-2のＮ末側１番目までのアミノ酸配列；（ｉｉ）Cys-2とCys-3の間のループII領域中のCys-2のＣ末側３番目からCys-3のＮ末側１番目までのアミノ酸配列；（ｉｉｉ）Cys-5とCys-6の間のループIII領域中のCys-5のＣ末側２番目からCys-6のＮ末側３番目までのアミノ酸配列；および（ｉｖ）Cys-6からC末端側のテール領域中のCys-6のＣ末側３番目からC末端までのアミノ酸配列。
