本发明公开了一种同时鉴别山羊绒和绵羊毛成分的检测引物、试剂盒及方法,具体是纺织品中同时鉴别山羊绒和绵羊毛成分的PCR-DHPLC检测引物、试剂盒及检测鉴别方法。首先针对山羊和绵羊线粒体DNA序列,分别设计了检测用引物对SEQ ID NO.1~2和SEQ ID NO.3~4,采用PCR-DHPLC法对纺织品中的山羊绒和绵羊毛成分同时进行鉴别。本发明所述试剂盒中包括PCR反应液、dNTP各2.5mM Taq DNA聚合酶5U/μl及引物对各10μM。本发明的引物特异性强,检测试剂盒及方法简便易用,可快速鉴别纺织品中是否含有山羊绒及绵羊毛,结果准确,具有很高的特异性和灵敏度。