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一种基因工程技术制备共表达重组酶的方法
- 专利权人:
- 山西天骄食业有限公司;中国科学院天津工业生物技术研究所;山西天骄生物集团有限公司
- 发明人:
- 王晓艳,门燕,冯俊敏,孙媛霞,张佩舜,朱玥明,康振奎,巩晋龙,郑丽萍,王小鹏,李奠础
- 申请号:
- CN201310720225.X
- 公开号:
- CN103710329A
- 申请日:
- 2013.12.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 崔雪花
- 摘要:
- 本发明属于双酶共表达技术领域,具体涉及的是定点突变的葡萄糖异构酶和D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达;本发明为了克服现有技术的不足,提供一种对葡萄糖异构酶146位氨基酸定点突变,并与D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达的方法,具体为:将定点突变后的葡萄糖异构酶的核苷酸序列与D-阿洛酮糖3-差向异构酶核苷酸序列分别进行PCR扩增、纯化、克隆;将克隆得到的双酶核苷酸序列分别与pCDFDuet-1载体进行双酶切,酶切产物纯化连接,构建重组表达质粒,诱导表达得到重组菌,收集重组菌超声破碎得到含有双酶的粗酶液。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/