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一种基因工程技术制备共表达重组酶的方法
专利权人:
山西天骄食业有限公司;中国科学院天津工业生物技术研究所;山西天骄生物集团有限公司
发明人:
王晓艳,门燕,冯俊敏,孙媛霞,张佩舜,朱玥明,康振奎,巩晋龙,郑丽萍,王小鹏,李奠础
申请号:
CN201310720225.X
公开号:
CN103710329A
申请日:
2013.12.24
申请国别(地区):
中国
年份:
2014
代理人:
崔雪花
摘要:
本发明属于双酶共表达技术领域,具体涉及的是定点突变的葡萄糖异构酶和D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达;本发明为了克服现有技术的不足,提供一种对葡萄糖异构酶146位氨基酸定点突变,并与D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达的方法,具体为:将定点突变后的葡萄糖异构酶的核苷酸序列与D-阿洛酮糖3-差向异构酶核苷酸序列分别进行PCR扩增、纯化、克隆;将克隆得到的双酶核苷酸序列分别与pCDFDuet-1载体进行双酶切,酶切产物纯化连接,构建重组表达质粒,诱导表达得到重组菌,收集重组菌超声破碎得到含有双酶的粗酶液。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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