The invention relates to improved methods for producing protein conjugates from ketone-modified protein. In one embodiment, the protein is produced by combining two free cysteines by reacting with 1,3-dihaloacetone or similar ketone-containing reagent that binds the sulfur atoms of the two cysteines to each other. The ketone inserted between the sulfur atoms is then used to form the oxime, thus conjugating the protein to the payload. In another embodiment, the two cysteine residues are joined together by reaction with 1,3-dihaloacetone or a similar reagent, and the resulting ketone is used to form an oxime with a suitable payload molecule, thus conjugating the protein to the payload. The method provides improved reaction conditions for the formation of oxime, resulting in a higher yield and homogeneity of the product.Изобретение относится к усовершенствованным способам получения конъюгатов белка из кетон-модифицированного белка. В одном варианте осуществления белок получают путем соединения двух свободных цистеинов посредством реакции с 1,3-дигалогенацетоном или аналогичным кетон-содержащим реагентом, связывающей атомы серы двух цистеинов друг с другом. Кетон, вставляемый между атомами серы, затем используется для образования оксима, таким образом осуществляя конъюгацию белка с полезной нагрузкой. В другом варианте осуществления два цистеиновых остатка соединены вместе с помощью реакции с 1,3-дигалогенацетоном или аналогичным реагентом, а полученный кетон используется для образования оксима с подходящей молекулой полезной нагрузки, таким образом конъюгируя белок с полезной нагрузкой. Способ обеспечивает улучшенные условия реакции образования оксима, в результате чего достигаются более высокие выход и гомогенность продукта.
