CHU NANTES;INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE (INSERM);UNIVERSITE DE NANTES;ASSOCIATION FRANCAISE CONTRE LES MYOPATHIES
发明人:
BRUMENT, Nicole
申请号：
EPEP2016/052739
公开号：
WO2016/128407A8
申请日:
2016.02.09
申请国别(地区):
EP
年份:
2018
代理人:
摘要：
The invention describes a method for obtaining purified recombinant Adeno-Associated Virus particles (rAAV), comprising the steps of: a) performing a depth filtration of a starting material previously obtained from cells producing rAAV particles, the said starting material being selected in a group comprising a cell lysate and a culture supernatant, whereby a rAAV-containing clarified composition is provided； b) submitting the rAAV-containing clarified composition to a first step of anion- exchange chromatography on a chromatographic support wherein elution is performed by using a linear salt gradient and wherein the rAAV-containing fraction is collected, whereby a first rAAV enriched composition is provided； c) submitting the first rAAV enriched composition at least once to a second step of anion-exchange chromatography on a chromatographic support wherein elution is performed by using a linear salt gradient and wherein the rAAV-containing fraction is collected, whereby a second rAAV enriched composition is provided； d) submitting the second rAAV enriched composition to a step of tangential flow filtration, whereby purified recombinant Adeno-Associated Virus particles (rAAV) are provided.L'invention concerne un procédé permettant d'obtenir des particules de virus adéno-associé recombinant (rAAV) purifiées, comprenant les étapes consistant à : a) réaliser une filtration en profondeur d'un matériel de départ préalablement obtenu à partir de cellules produisant des particules de rAAV, ledit matériel de départ étant choisi dans un groupe comprenant un lysat cellulaire et un surnageant de culture, grâce à quoi une composition clarifiée contenant rAAV est obtenue； b) soumettre la composition clarifiée contenant rAAV à une première étape de chromatographie échangeuse d'anions sur un support chromatographique, l'élution étant effectuée à l'aide d'un gradient de sel linéaire et la fraction contenant rAAV étant recueillie, grâce à quoi une première composition enrichie en rA
