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一种人血管内皮细胞生长抑制因子rhVEGI-192A的重组蛋白的制备方法
- 专利权人:
- 中山大学
- 发明人:
- 黎孟枫,朱勋,李鲁远,袁洁,吴珏珩,何振健,古明晖,夏蕾,贺海朋,马剑达
- 申请号：
- CN200910037702.6
- 公开号：
- CN101503697B
- 申请日:
- 2009.03.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 刘孟斌
- 摘要：
- 本发明提供了一种人血管内皮细胞生长抑制因子rhVEGI-192A的重组蛋白的制备方法，包括用VEGI-192A基因编码的核苷酸序列构建表达载体，并将所述表达载体在宿主细胞中诱导表达的步骤。具体的，从人脐静脉血管内皮细胞系HUVEC的总RNA扩增得到VEGI-192A基因片段，使用限制性内切酶双酶切取目的基因，连接至表达载体pET-30a中构建重组蛋白表达载体，再转化至大肠杆菌宿主菌中诱导表达，最后纯化蛋白。该方法在保持rhVEGI-192重组蛋白天然空间构象的基础上，建立了高效、高产量、高活性、高纯度表达目的蛋白的原核表达体系，优化了表达条件，建立了目的产物分离、纯化及复性的方法。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
