Provided is a method for preparing a Leydig-like cell from a human pluripotent stem cell. Further provided is a human pluripotent stem cell-derived Leydig-like cell. It is possible to prepare a Leydig-like cell by overexpressing the NR5A1 gene in a human pluripotent stem cell. This human pluripotent stem cell-derived Leydig-like cell can be prepared using a method including 1) a step for introducing the NR5A1 gene into a human pluripotent stem cell, and 2) a step for expressing NR5A1 in the human pluripotent stem cell. A human pluripotent stem cell-derived Leydig-like cell prepared using this method has a testosterone-producing ability, and expresses INSL3, 17βHSD3, or LHCGR.L'invention concerne un procédé de préparation d'une cellule de type Leydig à partir d'une cellule souche pluripotente humaine. Une cellule de type Leydig dérivée d'une cellule souche pluripotente humaine est en outre décrite. La cellule de type Leydig peut être préparée par surexpression du gène NR5A1 chez une cellule souche pluripotente humaine. Le procédé de préparation de ladite cellule de type Leydig dérivée d'une cellule souche pluripotente humaine peut comprendre 1) une étape d'introduction du gène NR5A1 dans une cellule souche pluripotente humaine, et 2) une étape d'expression de NR5A1 chez la cellule souche pluripotente humaine. La cellule de type Leydig dérivée d'une cellule souche pluripotente humaine préparée à l'aide de ce procédé a une capacité de production de testostérone, et exprime INSL3, 17βHSD3, ou LHCGR.ヒト多能性幹細胞からライディッヒ様細胞への作製方法を提供する。さらには、ヒト多能性幹細胞由来のライディッヒ様細胞を提供する。ヒト多能性幹細胞にNR5A1遺伝子を過剰発現させることで、ライディッヒ様細胞を作製することができる。本発明のヒト多能性幹細胞由来ライディッヒ様細胞は、1)ヒト多能性幹細胞にNR5A1遺伝子を導入する工程、及び2)ヒト多能性幹細胞にNR5A1を発現させる工程含む方法で作製することができる。本発明の方法で作製されたヒト多能性幹細胞由来ライディッヒ様細胞はテストステロン産生能を有し、INSL3、17βHSD3及びLHCGRからなるいずれかが発現する。