本发明涉及分子生物学、基因工程以及蛋白工程领域,旨在提供一种菜蛾盘绒茧蜂畸形细胞丝氨酸蛋白酶抑制剂CvT‑SPI基因及应用。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,由该基因编码的蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。由该基因体外原核表达获得的重组蛋白能够有效抑制其寄主小菜蛾血淋巴酚氧化酶原的激活,从而抑制寄主血淋巴的黑化作用,减弱寄主的免疫反应,为获得新型转基因抗虫作物提供了序列参考。该重组蛋白能够抑制枯草杆菌蛋白酶A,胰蛋白酶和猪胰腺弹性蛋白酶的活性,对于开发丝氨酸蛋白酶抑制剂类药物具有重要的意义。本发明能够在较短的时间内获得大量的可溶性CvT‑SPI重组蛋白,为进行CvT‑SPI的活性实验提供了便利。