Provided is a method for the knock-in of DNA into a cellular genome, said method being characterized by including a step for introducing, into a cell, donor DNA, two types of single-stranded oligonucleotides (ssODN), and at least one artificial nuclease system capable of cleaving a target sequence of the cellular genome. The artificial nuclease system cleaves a target sequence in the cellular genome. Each of the two types of ssODN is complementary to a respective end of the cellular genome created by cleaving the target sequence, and to a respective end of the introduced donor DNA. The donor DNA is knocked in at the cleavage site via the two types of ssODN.Linvention concerne un procédé pour le knock-in dADN dans un génome cellulaire, ledit procédé étant caractérisé en ce quil comprend une étape consistant à introduire, dans une cellule, de lADN donneur, deux types doligonucléotides simple brin (ssODN) et au moins un système de nucléase artificielle pouvant cliver une séquence cible du génome cellulaire. Le système de nucléase artificielle clive une séquence cible dans le génome cellulaire. Chacun des deux types de ssODN est complémentaire à une extrémité respective du génome cellulaire créé par clivage de la séquence cible et à une extrémité respective de lADN donneur introduit. LADN donneur est inséré de manière ciblée dans le site de clivage par les deux types de ssODN.本発明は、細胞ゲノムの標的配列を切断可能な少なくとも1つの人工ヌクレアーゼシステム、ドナーDNA及び二種類の一本鎖オリゴヌクレオチド(ssODN)を細胞に導入する工程を含み、前記人工ヌクレアーゼシステムは細胞ゲノム上の標的配列を切断し、二種類のssODNは各々細胞ゲノムの標的配列の切断により生じた各端部とドナーDNAの各導入末端に相補性を有し、ドナーDNAは、二種類のssODNを介して切断部位にノックインされることを特徴とする、ドナーDNAを細胞ゲノムにノックインする方法を提供するものである。
