本发明涉及AFP重组蛋白和体外高效重组表达的方法，具体涉及一种人工信号肽‑AFP‑609aa‑6his的重组蛋白和哺乳动物瞬时表达系统体外高效重组表达方法，其DNA序列如SEQ ID NO:1所示，a.优化AFP重组蛋白DNA序列,b.将重组蛋白基因通过双酶切克隆到pcDNA3.1+载体中，构建pcDNA3.1+‑AFP表达质粒，并进行质粒抽提，c.将抽提得到的pcDNA3.1+‑AFP质粒用PEI转染进CHO‑S悬浮细胞进行重组蛋白的表达，d.7天后分离纯化得到的重组蛋白。本发明通过大规模瞬时悬浮CHO‑S表达系统制备的人工合成带有6HIS标签的AFP蛋白活性跟天然AFP蛋白相近，且得到的纯度较高，内毒素含量低，无动物源性蛋白的污染，可以有望作为肝癌免疫治疗的肿瘤抗原疫苗。
