3′‑RACE接头引物及3′端未知基因序列的扩增方法

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专利权人:

安徽省农业科学院水产研究所

发明人:

吴明林,李海洋,侯冠军,蒋阳阳,高远,张智勇

申请号：

CN201711053639.6

公开号：

CN107760678A

申请日:

2017.10.31

申请国别(地区):

中国

年份:

2018

代理人:

沈尚林

摘要：

本发明公开了3′‑RACE接头引物及3′端未知基因序列的扩增方法。其中3′‑RACE接头引物具有由茎柄区、茎环区和PolyA结合区构成的茎环结构；茎柄区和茎环区具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；PolyA结合区设计15个、16个、17个、18个、19个或20个连续的胸腺嘧啶。本发明的3′‑RACE接头引物两段茎柄区序列碱基互补，形成茎环的柄部。柄部的碱基堆积使引物的稳定性增加，提高了逆转录效率。其双链结构和自身互补形成茎环构象，可避免逆转录引物与目的RNA模板发生杂交，减少背景干扰。在3′‑RACE接头引物茎环区还特别插入较多G/C碱基，提高其退火温度，减少PCR非特异性扩增。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/