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一株高效表达类人胶原蛋白的ptsG基因敲除重组菌及其构建方法和蛋白表达
专利权人:
西北大学
发明人:
范代娣,骆艳娥,马晓轩
申请号:
CN201310157411.7
公开号:
CN103224901B
申请日:
2013.05.02
申请国别(地区):
中国
年份:
2015
代理人:
李罡
摘要:
本发明涉及一株高效表达类人胶原蛋白的ptsG基因敲除重组菌及其构建方法和蛋白表达。利用大肠杆菌发酵生产类人胶原蛋白时,乙酸积累会影响菌体生长及蛋白表达,而现有减少乙酸副产物的方法会降低胶原蛋白产量。本发明以保藏编号为CGMCCNo.0743的大肠杆菌BL21为出发菌,采用Red同源重组,用安普霉素抗性基因替换大肠杆菌基因组上的ptsG基因,然后通过质粒pCP20表达的FLP内切酶消除安普霉素抗性基因,得到敲除ptsG基因的大肠杆菌工程菌CGMCCNo.7331。本发明通过基因工程手段改造大肠杆菌葡萄糖吸收途径,减少乙酸积累,提高类人胶原蛋白的积累,葡萄糖的消耗量减少9%-28%,类人胶原蛋白的产量可提高20%-30%。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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