PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a thiomersal-free vaccine.SOLUTION: There is disclosed a process for producing a stable immunogenicity B hepatitis vaccine not containing thiomersal of the amount of traces at all, which includes: a step (a) of allowing a B hepatitis surface antigen to appear in a saccharomyces cerevisiae as a recombinant protein； a step (b) of treating the saccharomyces cerevisiae cells to produce a crude antigen preparation； a step (c) of subjecting the crude antigen preparation to gel permeation chromatography to produce an antigen-containing eluent； wherein the elution buffer to be used does not contain thiomersal； a step (d) of subjecting the antigen-containing eluent obtained after the step (c) to anion-exchange chromatography； a step (e) of adding cysteine to the antigen-containing eluent obtained after the step (d)； and a step (f) of subjecting the preparation from the step (e) to CsC1 density gradient centrifugation to obtain the purified B hepatitis surface antigen.【課題】チオメルサールフリーのワクチンの提供。【解決手段】痕跡量のチオメルサールも含まない安定な免疫原性B型肝炎ワクチンの製造方法であって、（a）サッカロミセス・セレビシエ中で組換えタンパク質としてB型肝炎表面抗原を発現させる；（b）該サッカロミセス・セレビシエ細胞を処理して粗製の抗原調製物を産生する；（c）該粗製の抗原調製物をゲル浸透クロマトグラフィーに供することによって抗原含有溶離液を産生する。ここで使用する溶離バッファーはチオメルサールを含有しない；（d）ステップ(c)後に得られた該抗原含有溶離液をアニオン交換クロマトグラフィーに供する。；（e）ステップ(d)後に得られた該抗原含有溶離液にシステインを添加する；（f）ステップ(e)からの調製物をCsCl密度勾配遠心分離に供することによって、精製されたB型肝炎表面抗原を得る、前記方法。【選択図】なし
