A method for culturing mesenchymal stem cells. The method includes isolating mesenchymal stem cells having a size of 8 μm or less and culturing the mesenchymal stem cells in a medium containing calcium and magnesium and under a low oxygen condition. The method can significantly improve the proliferative capacity and differentiation potential of the mesenchymal stem cells.La présente invention concerne un procédé de culture de cellules souches mésenchymateuses, consistant à isoler des cellules souches mésenchymateuses possédant une taille inférieure ou égale à 8 μm et cultiver les cellules souches mésenchymateuses dans un milieu contenant du calcium et du magnésium et dans un état de faible teneur en oxygène. Le procédé de la présente invention peut significativement améliorer la capacité proliférative et le potentiel de différenciation des cellules souches mésenchymateuses.