A method of increasing packing performance, transduction efficiency, and / or gene transfer efficiency of a parental AAV, said method comprising the steps of: (a) comparing a parental AAV capsid sequence with a functional AAV capsid sequence library in alignment, wherein said library comprises at least four functional AAV capsids from at least two different clades, and further comprises at least two sequences from each clade； (b) identify at least one singletón in the parental AAV capsid, said singletón being an amino acid residue at a position in the parental AAV capsid that differs from the amino acid residue at the corresponding position of the aligned AAV capsid sequences aligned in the library, all of which have the same amino acid residue in that position； (c) alter the singlet in the parental AAV capsid with respect to the amino acid located in the corresponding position in the functional AAV capsid sequences in the library, to provide a modified AAV capsid sequence, and (d) evaluate the modified AAV in terms of packaging performance, transduction efficiency, and / or increased gene transfer efficiency, compared to parental AAV.Un método de incremento del rendimiento de empaquetamiento, de la eficacia de transducción, y/o de la eficacia de transferencia de gen de un AAV parental, comprendiendo dicho método las etapas de: (a) comparar una secuencia de cápside de AAV parental con una librería de secuencias de cápside de AAV funcional en alineamiento, en la que dicha librería comprende al menos cuatro cápsides de AAV funcional procedentes de al menos dos clados diferentes, y comprende además al menos dos secuencias procedentes de cada clado； (b) identificar al menos un singletón en la cápside de AAV parental, siendo dicho singletón un residuo de aminoácido en una posición en la cápside de AAV parental que difiere del residuo de aminoácido en la posición correspondiente de las secuencias de cápside de AAV funcional alineadas en la librería, todas las cuales tiene
