本发明涉及一种抑制肿瘤细胞增殖的重组腺病毒载体的构建方法，该方法由以下步骤组成：(1)取如SEQ ID NO.1所示的N端带有6个his标签的人端粒酶C端第936-1132片段的编码序列，经双酶切、连接反应克隆至含有绿色荧光蛋白基因GFP的穿梭质粒中，得到重组穿梭质粒；(2)将得到的重组穿梭质粒进行PmeⅠ酶切线性化，通过与骨架质粒PAdEasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组，得到重组腺病毒质粒；(3)将得到的重组腺病毒质粒转染HEK293细胞进行重组包装，收集具有绿色荧光的细胞，得到细胞包装的重组腺病毒；(4)将得到细胞包装的重组腺病毒采用氯化铯梯度离心法进行纯化，得到重组腺病毒载体。本方法所得到的重组腺病毒载体不仅可抑制肿瘤细胞增殖，而且起效快。
