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利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用
- 专利权人:
- 天津农学院
- 发明人:
- 金天明,孙颖,高静,徐良,董东晓,秦云倩
- 申请号:
- CN201210047696.4
- 公开号:
- CN102604992A
- 申请日:
- 2012.02.28
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种利用TRAIL和HN基因构建重组腺病毒的方法及重组腺病毒和应用,使双基因在抑制肿瘤细胞生长方面发挥协同作用。采用从鸡脾细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中分别扩增出TRAIL和HN基因序列,通过定点突变和重叠延伸拼接法实现TRAIL和HN基因以柔性氨基酸的linker连接;将获得的目的基因克隆到pShuttle-CMV穿梭载体中,经与pAd-Easy骨架载体共转染大肠杆菌BJ5183感受态细胞,使其在BJ5183内进行同源重组,构建了包含目的基因的重组腺病毒质粒pAd-TRAIL和pAd-TRAIL-linker-HN;将重组腺病毒质粒由PacI酶切后,经脂质体介导,转染AD293细胞,包装后获得重组腺病毒;并对双基因抑瘤作用的协同效应进行评价。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/