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采用芥菜型油菜基因ANS和埃塞俄比亚芥BAN共转化提高大肠杆菌中原花色素含量的方法
- 专利权人:
- 湖南科技大学
- 发明人:
- 刘丽莉,严明理,向建华,孙婵,尹小明
- 申请号:
- CN201210295300.8
- 公开号:
- CN102827861A
- 申请日:
- 2012.08.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 高红旺
- 摘要:
- 本发明公开了一种采用芥菜型油菜基因ANS和埃塞俄比亚芥基因BAN共转化提高大肠杆菌中原花色素含量的方法。本发明从芥菜型油菜种子的cDNA中克隆花色素合成酶ANS基因和埃塞俄比亚芥种子的cDNA克隆花色素还原酶BAN基因,构建含ANS和BAN基因的原核表达载体pET-ANS-BAN,将ANS和BAN基因同时导入BL21大肠杆菌菌株。转化菌株在的LB液体培养基中,28-38℃,150-250rpm(转/分钟)培养6-12小时候后,再转移到葡萄皮提取物(0.2-0.8g/L)的LB液体培养基中,28-38℃,150-250rpm震荡培养36-54小时后,离心收集菌体,采用DMACA-HCl法测定大肠杆菌所含的原花色素的量。本发明获得的转基因大肠杆菌中原花色素的含量显著提高,最高达到非转化对照菌株的24.2倍。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/