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采用芥菜型油菜基因BAN和DFR共转化提高大肠杆菌中原花色素含量的方法
- 专利权人:
- 湖南科技大学
- 发明人:
- 严明理,刘丽莉,向建华,屠波,王帅斌
- 申请号：
- CN201210295306.5
- 公开号：
- CN102827849A
- 申请日:
- 2012.08.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 高红旺
- 摘要：
- 本发明公开了一种采用芥菜型油菜基因BAN和DFR共转化提高大肠杆菌中原花色素含量的方法。本发明从芥菜型油菜紫叶芥种皮的cDNA中克隆花色素还原酶BAN基因和4-二氢黄酮醇还原酶DFR基因，构建含BAN和DFR基因的原核表达载体pET-BAN-DFR，将BAN和DFR基因同时导入DH5α大肠杆菌。转化菌株在LB液体培养基中，25-37℃，150-250rpm(转/分钟)培养6-14小时候后，再在含黑色大豆种皮提取物(0.5-1.0g/L)的LB液体培养基中，25-37℃，150-250rpm震荡培养36-54小时后，离心收集菌体，采用DMACA-HCl法测定大肠杆菌所含的原花色素的量。本发明获得的转基因大肠杆菌中原花色素的含量显著提高，最高达到非转化对照菌株的19.8倍。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
