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克氏原螯虾眼柄多肽激素的提取方法
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
- 发明人:
- 水燕,徐增洪,沈怀舜,周鑫
- 申请号：
- CN201510761171.0
- 公开号：
- CN105353055A
- 申请日:
- 2015.11.10
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 冯智文
- 摘要：
- 本发明公开了一种克氏原螯虾眼柄多肽激素的提取方法，所述的方法包括以下步骤：1.眼柄分离将眼柄从基部剪断，在预冷的含0.7％NaCl的Tris-HCl缓冲液中解剖出视上神经节(包含窦腺)，每1mL缓冲液放入50个视上神经节。2.超声波破碎超声波输出功率为150-300W，超声处理温度45-65℃，超声处理时间为工作5s-间隔5s，循环30次。3.受热粗分离上清液在80-85℃下水浴5min并离心，重复热水浴两次。4.反相高效液相色谱先经过Sep-Pak小柱，再经过反相高效液相色谱柱，柱温40℃；流动相为乙腈-甲醇-0.6％乙酸(体积比为5:50:45)，0.8mL/min恒流洗脱；收集时间为洗脱开始的2-65min，检测波长280nm。本发明用避免低温的超声破碎结合反相高效液相色谱，提取效率高，纯度好，提取的眼柄多肽激素混合液可以用于实验室功能研究。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
