ALLAN BRADLEY,アラン・ブラドリー,LEE E-CHIANG,イー－チアン・リー,LIANG QI,キ・リアン,WEI WAN,ウェイ・ワン,イー-チアン・リー
申请号：
JP2017017360
公开号：
JP2017086084A
申请日:
2017.02.02
申请国别(地区):
JP
年份:
2017
代理人:
摘要：
PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a process for the generation in non-human mammals of antibodies that comprise a human Ig variable region, and further to provide non-human animal models for the generation of such antibodies.SOLUTION: The present invention relates to a method of producing a rodent, the method comprising inserting, into a rodent ES cell genome, for example, a plurality of human IgH V regions, one or more human D regions, and one or more human J regions upstream of a host rodent heavy chain constant region, wherein a) the insertion of a human heavy chain DNA is carried out between a rodent constant region and a last 3' rodent J region； b) the insertion is such that the rodent is able to produce a repertoire of chimaeric antibodies or chimaeric heavy chains having a rodent constant region and a human variable region； and c) the insertion process is started at a site where a starting cassette is inserted into a genome and a unique target region is provided, a second DNA fragment is inserted into a part of a first DNA fragment following the insertion of the first DNA fragment into the starting cassette, and a length of less than 5' of an upstream (5') DNA insert increases during a stepwise insertion.SELECTED DRAWING: None【課題】本発明の目的は、非ヒト哺乳動物中でヒトIg可変領域を含む抗体を生成するための方法を提供し、さらに、そのような抗体を生成するための非ヒト動物モデルも提供することである。【解決手段】本発明の目的は、例えば、宿主げっ歯動物重鎖定常領域の上流の複数のヒトIgH V領域、1つまたは複数のヒトD領域、および1つまたは複数のヒトJ領域を、げっ歯動物ＥＳ細胞ゲノムに挿入する工程を含む、げっ歯動物を作製する方法であって、a)ヒト重鎖DNAの挿入がげっ歯動物定常領域と最後の3'げっ歯動物J領域との間でなされ；b)前記挿入が、前記げっ歯動物が、げっ歯動物定常領域およびヒト可変領域を有するキメラ抗体またはキメラ重鎖のレパートリーを生成することができるようなものであり、c)前記挿入プロセスが、開始カセットがゲノムに挿入され、独特の標的領域をもたらす部位で開始され、第1のDNA断片の開始カセットへの挿入に続いて、次に、第1のDNA断片の一部への第2のDNA断片の挿入がなされ、かつ、段階的な挿入の間、上流(5’)DNAインサートの5’末端の長さが増大する、方法によって解決することができる。【選択図】なし
