The present invention provides a method for generating spinal cord glutamatergic interneurons (V2a interneurons) from human pluripotent stem cells (hPSCs). In the method of the present disclosure, it is also possible to culture the first population of hPSCs in vitro in a neural induction medium comprising a retinoic acid signaling pathway activator, sonic hedgehog (Shh) signaling pathway activator and Notch signaling pathway inhibitor. Well, culture produces a second population of cultured cells that contain CHX10 + V2a interneurons. Further provided are non-human animal models comprising spinal cord glutamatergic interneurons from hPSCs, and methods of generating non-human animal models.【解決手段】ヒト多能性幹細胞(hPSC)から脊髄グルタミン酸作動性介在ニューロン(V2a 介在ニューロン)を生成する方法を提供する。本開示の方法では、レチノイン酸シグナル経路活性化剤、ソニックヘッジホッグ(Shh) シグナル経路活性化剤及びNotch シグナル経路阻害剤を含む神経誘導培地で第1の集団のhPSCをインビトロで培養してもよく、培養により、CHX10+ V2a介在ニューロンを含む第2の集団の培養細胞を生成する。hPSC由来の脊髄グルタミン酸作動性介在ニューロンを含む非ヒト動物モデル、及び非ヒト動物モデルを生成する方法を更に提供する。