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靶向敲除ARID1A基因的sgRNA、构建ARID1A基因缺失细胞株的方法及应用
- 专利权人:
- 西安交通大学医学院第一附属医院
- 发明人:
- 邓元,汪园园,廉洁,张冠军,李晓锋,刘希
- 申请号：
- CN202110572641.4
- 公开号：
- CN113308470A
- 申请日:
- 2021.05.25
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2021
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了靶向敲除ARID1A基因的sgRNA、构建ARID1A基因缺失细胞株的方法及应用，属于生物医药技术领域。通过构建重组慢病毒质粒ARID1A sgRNA‑lentiCRISPR v2、将CRISPR/Cas9慢病毒系统通过293T细胞进行包装获得慢病毒颗粒、将慢病毒颗粒感染目的细胞株、有限稀释法传代筛选，可获得稳定的ARID1A基因敲除的细胞株。Western blot蛋白表达检测显示，基因敲除的细胞株ARID1A蛋白表达完全缺失。另外，ARID1A基因敲除的细胞株增殖能力明显增强。结果表明，利用CRISPR/Cas9慢病毒系统成功敲除ARID1A基因后，可促使胃上皮细胞的恶性转化。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
