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特异性抑制人SIRT1基因表达的shRNA慢病毒表达载体及其构建方法与应用
- 专利权人:
- 中国人民解放军第四军医大学
- 发明人:
- 白晓智,胡大海,陶克,韩军涛,朱雄翔,董茂龙,苏琳琳,石继红,汤朝武
- 申请号：
- CN201310550544.0
- 公开号：
- CN103589753B
- 申请日:
- 2013.11.08
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明提供一种特异性抑制人SIRT1基因表达的shRNA慢病毒表达载体及其构建方法与应用，该表达载体是根据人SIRT1的mRNA全序列，应用RNA structure 4.4软件对靶mRNA的序列进行评估得到4条靶核苷酸序列，分别在这4条靶核苷酸序列两端引入相应的接头后得到相对对应的shRNA寡核苷酸序列，将shRNA寡核苷酸序列插入到所述的多克隆位点、连结至慢病毒siRNA载体pFIV-H1/U6-copGFP中。所述的多克隆位点包括Bbs I酶切位点，正义及反义链的5’端分别添加了AAAG及AAAA，与Bbs I酶切后形成的粘性末端互补；本发明提供的人SIRT1基因表达的shRNA慢病毒表达载体具有转染效率高，可持续、稳定、特异地抑制人SIRT1基因的表达，可用于科学研究及制备治疗人SIRT1基因表达异常相关疾病的药物。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
